實(shí)驗(yàn)視頻之8孔可移除插件培養(yǎng)載玻片操作視頻

**熒光技術(shù)（Immunofluorescence technique）又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記**技術(shù)中發(fā)展*早的一種。它是在**學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來(lái)就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。

細(xì)胞**熒光實(shí)驗(yàn)?zāi)闶窃趺醋龅模?

還在用小玻片，先泡酸、再晾干、再 coating、再種細(xì)胞、染色、封片成像？

**熒光一體化·新方法

1.一體化小室

**熒光一體化新方法介紹，先養(yǎng)細(xì)胞、然后直接固定、染色、成像，在培養(yǎng)皿/玻片上全部搞定！能幫您把細(xì)胞養(yǎng)好、又幫您省時(shí)省力的獲得漂亮的成像結(jié)果（見(jiàn)圖 1）！

圖 1. 傳統(tǒng)爬片方法與 ibidi 產(chǎn)品**熒光實(shí)驗(yàn)比較

2.ibidi 產(chǎn)品底部媲美蓋玻片厚度，為高分辨率顯微成像而設(shè)計(jì)的光學(xué)特性

德國(guó) ibidi 公司**的μ-Slide 與μ-Dish 系列產(chǎn)品，與一般市面上常見(jiàn)的細(xì)胞培養(yǎng)皿不同，其底部是由獨(dú)特的塑料制成，具有與玻璃材質(zhì)媲美的高光學(xué)穿透與低背景熒光等特性。相較于一般細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品（圖 2 左），ibidi 產(chǎn)品（圖 2 右）底部構(gòu)造厚度符合 No.1.5 標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片厚度（180 μm），用高倍鏡物鏡觀察，可以使焦距集中在待測(cè)樣本上，產(chǎn)生良好的成像結(jié)果。

圖 2. ibidi 細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品底部媲美蓋玻片厚度

3.ibidi 產(chǎn)品底部化學(xué)耐受性強(qiáng)，適用于多種常用的細(xì)胞固定劑（見(jiàn)圖 3）圖 3.ibidi 產(chǎn)品底部適用的溶劑列表

4.多種多樣的細(xì)胞培養(yǎng)表面

細(xì)胞進(jìn)行生長(zhǎng)、發(fā)育和信號(hào)傳遞很大程度上取決于細(xì)胞容器的表面處理方式。ibidi 產(chǎn)品底部相比于普通培養(yǎng)皿更加平滑（見(jiàn)圖 4）。目前，ibidi 產(chǎn)品μ-Slides 和μ-Dishes 有標(biāo)準(zhǔn)底、玻璃底以及多種底部預(yù)包被的產(chǎn)品，適用于培養(yǎng)不同的細(xì)胞類型，不同底之間的比較。

ibidi 標(biāo)準(zhǔn)底具有親水超薄的特性，該底部的光學(xué)特性符合多種成像技術(shù)的要求，如相差、共聚焦和雙光子顯微成像。

ibiTreat，作為 ibidi 受歡迎的表面處理方式，通過(guò)了大量不同細(xì)胞系和原代細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試，且已發(fā)表的 2000 多篇使用了 ibidi 產(chǎn)品的期刊論文中，超過(guò) 90% 使用了 ibiTreat，表明大多數(shù)細(xì)胞在 ibiTreat 下生長(zhǎng)良好，無(wú)需進(jìn)行額外的表面處理。ibiTreat 是一種物理修飾的表面處理方式，讓耗材表面親水，利于絕大多數(shù)種類的細(xì)胞貼壁，可與其他標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿相媲美。

圖 4. AFM（原子力顯微技術(shù)）測(cè)量表面粗糙度。ibidi 產(chǎn)品（右下）比普通培養(yǎng)皿具有更平滑的底部構(gòu)造，更加的成像效果。

ibidi 標(biāo)準(zhǔn)底也有疏水、無(wú)包被的表面可以選擇?？梢愿鶕?jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求，進(jìn)行特定的包被，或者直接用來(lái)培養(yǎng)非貼壁細(xì)胞。

Ibidi 也有玻璃底的產(chǎn)品。玻璃底可以直接培養(yǎng)細(xì)胞，但可能需要進(jìn)行表面處理來(lái)促進(jìn)細(xì)胞更好的貼壁。ibidi 研發(fā)的玻璃底產(chǎn)品尤其適用于 TIRF、單光子及單分子應(yīng)用。

基于以上特殊的底部構(gòu)造，ibidi μ-Dish，μ-Slide 以及μ-plate 等產(chǎn)品都既適用于常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)，又可以簡(jiǎn)化**熒光實(shí)驗(yàn)步驟、節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間，并且獲得理想的顯微成像效果。

μ-Slides well 系列產(chǎn)品：μ-Slides 2 well，4 well，8well，18well(圖5）

圖5

在此基礎(chǔ)上，如果需要進(jìn)行更佳的相差或者高的顯微鏡成像實(shí)驗(yàn)，如進(jìn)行實(shí)時(shí)的活細(xì)胞不同位點(diǎn)的掃描，μ-Slides well ph+系列產(chǎn)品更適合您。在傳統(tǒng)的μ-Slides well 的孔的中間，ph+產(chǎn)品加了一層特殊的平板（見(jiàn)圖 6），這層平板可以有效避免開(kāi)放小室中影響相差成像效果的凹液面的形成。在這層平板與 well 的四周有縫隙，方便向其中加入細(xì)胞及換液等操作。

圖 6. μ-Slide ph+在中間有特殊的平板，四周有孔洞，方便鋪細(xì)胞及換液等操作，ph+有效防止凹液面形成，整個(gè)視野都有良好的相差成像效果。

μ-Slide channel系列產(chǎn)品

一體化小室產(chǎn)品還包括μ-Slide channel 系列產(chǎn)品（圖 7A），這類產(chǎn)品有通道式的細(xì)胞培養(yǎng)空間，同樣具有 ibidi 標(biāo)準(zhǔn)底，適合于高分辨率顯微成像。產(chǎn)品兩端有魯爾接頭，可應(yīng)用于流體剪切力實(shí)驗(yàn)，即在培養(yǎng)基流動(dòng)狀態(tài)下就行細(xì)胞培養(yǎng)。

在開(kāi)放小室中鋪細(xì)胞時(shí)，通常依賴于人為晃動(dòng)操作，對(duì)于新手尤其容易使細(xì)胞聚團(tuán)，導(dǎo)致細(xì)胞分布不均（圖 7C）。而通道式的設(shè)計(jì)，巧妙回避這一問(wèn)題，只需要向通道中加入細(xì)胞懸液，無(wú)需晃動(dòng)（圖 7B），輕松使細(xì)胞在通道中均勻分布（圖 7D）。另外當(dāng)需要進(jìn)行準(zhǔn)確的少量試劑換液時(shí)，或者試劑、抗體珍貴，μ-Slide channel 系列產(chǎn)品將是理想選擇。

圖 7. μ-Slide channel 系列產(chǎn)品。A，μ-Slide I 及μ-Slide IV 產(chǎn)品圖示。B，μ-Slide I 為例說(shuō)明系列產(chǎn)品適用步驟，向通道中加入 100 ul 細(xì)胞懸液，向一側(cè)儲(chǔ)液池中加入無(wú)細(xì)胞的培養(yǎng)液，向另一側(cè)儲(chǔ)液池中加入無(wú)細(xì)胞的培養(yǎng)液，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。C，開(kāi)放小室的細(xì)胞分布，依賴于晃動(dòng)操作，經(jīng)常會(huì)分布不均勻。D，channel 中細(xì)胞的分布，由于其獨(dú)特的集合設(shè)計(jì)，使細(xì)胞非常容易的均勻分布在通道中。

Removable & Sticky 系列產(chǎn)品

12/8/3 well Chamber, removable

另外，ibidi 公司還開(kāi)發(fā)了 Sticky 的 well 及通道（圖 8B-D）。這類產(chǎn)品通用性強(qiáng)，可與多種多樣的底部材料粘貼。而且對(duì)于不易放入通道培養(yǎng)的細(xì)胞、組織等，可以選擇先放在底部材料上，再將培養(yǎng)通道粘貼到其上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

圖 8. Removable & Sticky 系列產(chǎn)品。A，12 well Chamber, removable。B，sticky-Slide I Luer。C，sticky-Slide 8 well。D，sticky-Slide VI 0.4。

易必迪 ibidi 公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及功能實(shí)驗(yàn)的耗材及儀器開(kāi)發(fā)，產(chǎn)品設(shè)計(jì)巧妙，適用于各種各樣的實(shí)驗(yàn)需求，簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟，節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。